如何保存ELISA樣本以確保準確性
要保證ELISA檢測結(jié)果準確,需遵循「分裝置凍存、控制凍融次數(shù)、規(guī)避污染」的核心保存原則?,不同保存時長、不同樣本類型的具體操作規(guī)范如下:
一、通用保存核心規(guī)則
按單次用量分裝?:根據(jù)每次檢測所需樣本量提前分裝,避免后續(xù)反復(fù)凍融導(dǎo)致蛋白降解效價降低。
嚴格控制保存時長與溫度?:
短期保存(≤1周):2~8℃密封冷藏即可,不會影響檢測結(jié)果;
長期保存:需分裝后置于-20℃或-80℃凍存,優(yōu)先選擇-80℃,可保存1~6個月;超過半年的樣本不建議用于精準定量檢測。
絕對禁止反復(fù)凍融?:反復(fù)凍融1次就會導(dǎo)致蛋白濃度降低,凍融次數(shù)≥3次會直接造成結(jié)果偏差,因此分裝凍存是必須操作。
溶解后二次離心?:凍存樣本檢測前需緩慢解凍至室溫,充分混勻后再次離心去除沉淀,取上清進行檢測,避免沉淀雜質(zhì)干擾顯色。
二、不同類型樣本的保存細節(jié)

三、需要注意事項
血清在冰箱保存時間過長會導(dǎo)致IgG聚合,引發(fā)間接法ELISA本底加深,因此超過1周的檢測一定要凍存,不要冷藏放置。
保存時必須嚴格無菌操作,長期保存可添加低濃度防腐劑,但需確認防腐劑不會影響抗原抗體結(jié)合。
抗凝不凈的樣本會因纖維蛋白原干擾出現(xiàn)假陽性,若采集后不能及時離心,需4℃放置不超過2天,避免纖維蛋白析出干擾結(jié)果。
注:以上科研產(chǎn)品資料供參考!
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