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人多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)ELISA試劑盒使用說明書
BS-1939 人多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)ELISA試劑盒
用雙抗體夾心法,檢測(cè)血清、血漿或組織勻漿中PARP1,檢測(cè)波長450 nm,保存條件2–8℃,僅限科研使用。
- 檢測(cè)原理:預(yù)包被抗-PARP1捕獲抗體 + 生物素化檢測(cè)抗體 + 鏈霉親和素-HRP復(fù)合物 + TMB顯色(藍(lán)→黃,終止后),OD值與PARP1濃度正相關(guān)。
- 樣本類型:人血清、血漿(EDTA/肝素/檸檬酸鈉抗凝)、組織勻漿(PBS pH 7.4)、細(xì)胞裂解液或培養(yǎng)上清;避免含NaN?及溶血/渾濁樣本。
- 樣本處理:2000–3000 ×g 離心10–20 min,上清分裝–20℃或–80℃保存(避免反復(fù)凍融);使用前室溫平衡15–30 min。
- 典型操作流程:
?、?標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(常見范圍 0.78–50 ng/mL 或 100–3200 pg/mL);
?、?加樣(標(biāo)準(zhǔn)品/樣本 50–100 μL/孔);
?、?加HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體(100 μL/孔),37℃溫育60 min;
?、?洗板(20×濃縮洗滌液稀釋后洗5×);
?、?顯色(TMB 10–15 min 避光);
?、?終止(2 M H?SO? 50 μL/孔);
?、?450 nm讀數(shù)(15 min內(nèi)完成)。
- 關(guān)鍵注意事項(xiàng):嚴(yán)禁混用不同批號(hào)試劑;洗板后勿干孔;底物TMB應(yīng)無色,變藍(lán)則失效;終止液為稀硫酸;結(jié)果需以同板標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。
- 試劑盒組成(96T示例):預(yù)包被板、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干)、檢測(cè)抗體(生物素化)、SA-HRP、TMB顯色液A/B、終止液、20×洗滌液、樣本/抗體稀釋液;需自備酶標(biāo)儀、精密移液器、37℃孵育箱、蒸餾水。
- 有效期:多數(shù)為 6個(gè)月(2–8℃);開封后板條密封+4℃保存≤1周。
不同品牌的稀釋倍數(shù)、溫育時(shí)間、標(biāo)準(zhǔn)品濃度范圍略有差異,實(shí)際操作必須以所購試劑盒內(nèi)附紙質(zhì)說明書為準(zhǔn)。若已購買但未附說明書,請(qǐng)聯(lián)系供應(yīng)商索取PDF版。(僅“科研用途”)。
注:以上科研產(chǎn)品資料供參考!
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