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ELISA試劑盒血清樣本要怎樣保留
ELISA試劑盒的血清樣本保留需要遵循?采集分離→分裝→按期限條件保存?的標(biāo)準(zhǔn)化流程,具體操作步驟和要求如下:
一、采集與分離流程
使用?無(wú)熱源、無(wú)內(nèi)毒素?的無(wú)菌試管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫放置10分鐘~2小時(shí),或4℃條件下過(guò)夜,讓血液自然凝固使血清充分析出;建議傾斜容器擴(kuò)大液面橫截面,提升血清析出量。
4℃條件下?1000~3000g離心20分鐘?,仔細(xì)收集上清得到血清;若保存過(guò)程中出現(xiàn)沉淀或絮狀物,需要再次離心去除雜質(zhì)。本生BUNSEN試劑盒
二、分裝要求
分離后的血清建議按照單次檢測(cè)用量分裝到本生BUNSEN無(wú)菌離心管中,避免后續(xù)反復(fù)凍融破壞樣本中的蛋白質(zhì),導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果假陰性。操作需在潔凈生物安全臺(tái)進(jìn)行,全程佩戴無(wú)菌手套,避免細(xì)菌污染,否則菌體含有的內(nèi)源性HRP會(huì)引發(fā)檢測(cè)假陽(yáng)性。
三、保存條件與期限
保存時(shí)長(zhǎng)與溫度直接相關(guān),需根據(jù)檢測(cè)時(shí)間選擇對(duì)應(yīng)條件:
1周內(nèi)檢測(cè)?:可放置在?2~8℃冷藏保存?,無(wú)菌分離的血清可穩(wěn)定保存約1周。
1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)?:分裝后置于?-20℃冷凍保存?即可。
長(zhǎng)期保存(超過(guò)1個(gè)月)?:需置于?-70℃(或-80℃)超低溫冰箱?保存,可穩(wěn)定保存6個(gè)月,部分文獻(xiàn)顯示活性合格的樣本最長(zhǎng)可保存5年。
四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
絕對(duì)禁止反復(fù)凍融:凍融產(chǎn)生的機(jī)械剪切力會(huì)破壞蛋白,必須分裝后凍存,每次僅取出一份使用。
必須避免溶血:紅細(xì)胞破裂會(huì)釋放過(guò)氧化物酶活性物質(zhì),在HRP標(biāo)記的ELISA體系中會(huì)引發(fā)非特異性顯色,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn);若血清呈粉紅色提示溶血,需重新采集。
樣本融化:使用前需平衡至室溫,禁止用水浴鍋快速融化,融化后需輕柔混勻避免氣泡,禁止劇烈振蕩。
注:以上科研產(chǎn)品資料供參考,具體可咨詢技術(shù)老師!
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