小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1(UGT1A1)ELISA試劑盒技術(shù)說明書

　　BS-2682小鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1(UGT1A1)ELISA試劑盒

　　實(shí)驗(yàn)原理

　　本試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術(shù)，通過預(yù)包被小鼠UGT1A1單抗的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)抗原，再與HRP標(biāo)記的二抗形成復(fù)合物。經(jīng)TMB底物顯色后，450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，其與UGT1A1濃度呈正相關(guān)^^1^^。

　　試劑盒組成

　　核心組件：

　　預(yù)包被微孔板(96孔，12條×8孔)

　　UGT1A1標(biāo)準(zhǔn)品(78-5000pg/ml梯度濃度)

　　HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體、顯色劑(TMB)、終止液

　　濃縮洗滌液(需30倍稀釋)

　　輔助材料：樣本稀釋液、封板膜、密封袋等。

　　操作步驟

　　樣本處理：

　　血清/血漿：3000rpm離心10分鐘，避免溶血;若需保存，-20℃分裝防反復(fù)凍融。

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：

　　原倍標(biāo)準(zhǔn)品(5000pg/ml)按2倍梯度稀釋至5個(gè)濃度點(diǎn)。

　　加樣與孵育：

　　每孔加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl，37℃孵育30分鐘;

　　洗滌5次后加入HRP抗體，重復(fù)孵育。

　　顯色與測(cè)定：

　　加入TMB避光顯色15分鐘，終止液終止反應(yīng)后讀取OD值。

　　注意事項(xiàng)

　　樣本要求：避免NaN3(抑制HRP活性)，溶血樣本需重新采集。

　　操作規(guī)范：

　　加樣時(shí)避免觸碰孔壁，顯色前搖勻試劑;

　　超范圍樣本需用稀釋液調(diào)整后復(fù)測(cè)。

　　保存條件：試劑盒2-8℃避光保存，使用前室溫平衡20分鐘。

　　數(shù)據(jù)計(jì)算

　　通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合樣本OD值，乘以稀釋倍數(shù)(若有)得實(shí)際濃度。

　　注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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